Il fattore di crescita epidermico (EGF) è stato originariamente scoperto in preparazioni grezze di fattore di crescita nervoso preparato dalle ghiandole sottomascellari di topo come attività che induceva l'apertura precoce delle palpebre, l'eruzione degli incisivi, l'inibizione della crescita dei capelli e l'arresto della crescita quando iniettati nei topi neonati. È il prototipo di una famiglia di fattori di crescita derivati da precursori ancorati alla membrana. Tutti i membri di questa famiglia sono caratterizzati dalla presenza di almeno un'unità strutturale EGF (definita dalla presenza di un motivo conservato a 6 cisteine che forma tre legami disolfuro) nel loro dominio extracellulare. L'EGF è inizialmente sintetizzato come una proteina transmembrana precursore di 130 kDa contenente 9 unità EGF. La sequenza EGF solubile matura corrisponde all'unità EGF situata prossimalmente al dominio transmembrana. Il precursore dell'EGF di membrana è in grado di legarsi al recettore dell'EGF ed è stato segnalato come biologicamente attivo. L'EGF di ratto maturo condivide il 70 % di identità di sequenza aa con l'EGF umano maturo.
Fonte
Escherichia coli.
Peso molecolare
Circa 6.1 kDa, una singola catena polipeptidica non glicosilata contenente 53 amminoacidi, inclusi 3 legami disolfuro intramolecolari.
Attività biologica
Completamente biologicamente attivo rispetto allo standard. L'ED50 come determinato da un saggio di proliferazione cellulare utilizzando cellule Balb/c 3T3 murine è inferiore a 0.1 ng/ml, corrispondente a un'attività specifica > 1.0 × 107 UI/mg.
Forma
Polvere liofilizzata bianca filtrata sterile.
Formulazione
Liofilizzato da una soluzione filtrata di 0.2 um in PBS, pH 7.4.
endotossina
Meno di 1 EU/ug di rRtEGF come determinato dal metodo LAL.
Ricostituzione
Si consiglia di centrifugare brevemente questa fiala prima dell'apertura per portare il contenuto sul fondo. Ricostituire in acqua distillata sterile o tampone acquoso contenente 0.1 % BSA a una concentrazione di 0.1-1.0 mg/mL. Le soluzioni madre devono essere suddivise in aliquote di lavoro e conservate a ≤ -20 °C. Ulteriori diluizioni devono essere effettuate in appropriate soluzioni tamponate.
Stabilità e conservazione
Utilizzare un congelatore a sbrinamento manuale ed evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.- 12 mesi dalla data di ricevimento, da -20 a -70 °C come fornito.- 1 mese, da 2 a 8 °C in condizioni sterili dopo la ricostituzione.- 3 mesi, Da -20 a -70 °C in condizioni sterili dopo la ricostituzione.
